尹桂芳的艺术形象，特别是她的小生扮相，是她在越剧界留下深刻印记的一部分。尹桂芳自幼对戏曲充满热情，在十岁时就进入了科班学习，十二岁便开始在舞台上表演。她初期主要饰演花旦角色，但后来转而成为一名优秀的小生，并且致力于越剧的改革与创新。在1940年代，她积极探索新的表演风格和唱腔技巧，并最终创立了以自己为代表的小生流派——尹派。

尹派的特点是优雅中带有深沉的魅力，以及纯朴隽永的情感表达。这股气质可以在她1941年录制的《破腹验花·楼台盘妹》和1943年录制的《贾宝玉哭灵》这两首歌曲中找到体现。尹桂芳的声音厚重而音色甜润，但她的音域不宽广，因此她专注于发挥低音区的优势，追求唱腔声音色彩丰富多变。此外，她还注重字音结合，使得每个字都显得清晰自然。

尹派中的旋律往往位于中低音区回旋，但在关键句子时会使用异峰突起的手法，以增加表现力，如《红楼梦·哭灵》的“林妹妹变成宝姐姐”那句，就通过突然跳跃到较高音区并采用假声唱法，展现出了宝玉悲痛的心情。

慢板是尹派的一个亮点，它们优美舒展，而且擅长用大段叙述性“清板”细致刻画人物情感。创作时，她会运用各种艺术手段，如起腔安排、插句运用、板式转换和甩腔变化等，使整段音乐层次分明且自由自然。此外，她还善于根据人物感情变化，用忽快忽慢、紧松交替的手法来调整速度和节奏，使整个音乐既有规则又充满活力，如《浪荡子·叹钟点》的长片段“清板”，就通过九次速度变化揭示了主人公复杂的情绪波动。

起腔也是尹派的一个特色，其特点是在不同的剧目中根据不同人物感情进行变化，而通常出现在大段叙述性的音乐之中。例如，《山河恋·送信》中的“妹妹啊”是一种亲切婉转的声音，而《何文秀·算命》中的“妈妈听道”则更朴实直接，这些都是塑造人物心态的一种方式。而其他如《桃花扇·追念》、《秋海棠·心心相印》、《红楼梦·金玉良缘》以及《盘妻索妻·洞房》，每一处都有其独特之处。

在塑造不同角色的过程中，尹桂芳也吸收了兄弟剧种如京剧和苏州弹词等元素，为自己的作品增添新鲜血液。她甚至将京剧老生腔与绍剧激昂高亢的声音融合进去，比如在演绎国诗人屈原形象时，就采纳了一些京剧老生的技巧，以此来增强苍劲雄浑、刚健挺拔的情感氛围。而这样的创新也影响到了后来的许多艺术家，他们包括筱桂芳、高剑琳、宋普南等人，都受到了她的启发并继续发展着她的艺术理念。